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二硫鍵修飾肽的高效分析與純化:選擇Phenomenex Luna的理由

更新時間:2025-10-24點擊次數(shù):179

在現(xiàn)代生物制藥領域,隨著抗菌藥物耐藥性的加劇,藥物化學家們致力于開發(fā)新型抗菌化療藥物,其中海洋生物提取抗菌肽 (AntiMicrobial Peptides) 構成了一個令人興奮的研究領域。二硫鍵修飾肽因其在抗菌、抗癌等生物活性方面的突出作用,成為藥物開發(fā)中的重要研究方向。如何高效分析和純化這些肽類,仍然是實驗室面臨的一大挑戰(zhàn)?!禡DPI》雜志的一項研究[1]聚焦抗菌肽 Capitellacin,通過化學合成類似物,系統(tǒng)探究其分子內二硫鍵的功能的同時,驗證乙烯基硫醚作為二硫鍵替代物的可行性,為開發(fā)新型窄譜抗菌劑提供了關鍵依據(jù)。在該研究中,研究人員使用Phenomenex的Luna色譜柱來對合成肽進行分析和分離純化,這也許可以給相似研究工作者帶來一些參考和借鑒。


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研究團隊要合成兩類共 9 種 Capitellacin 類似物(二硫鍵修飾 + 乙烯基硫醚替代),并且完成從粗肽合成純化到活性分析。

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高純度制備:

Fmoc-SPPS 合成后,粗肽經(jīng)半制備型 Luna 柱純化,最終獲得純度 > 95% 的類似物,為后續(xù) MIC(最小抑菌濃度)和 CD(圓二色譜)實驗提供 “無雜質干擾" 的樣品基礎;

異構體分離:

合成乙烯基硫醚類似物時,曾出現(xiàn)熱力學 / 動力學異構體混峰,Luna 柱憑借獨特選擇性,可以觀察到不同異構體峰(如 “Dap18" 類似物的兩個同質量雜質峰),幫團隊鎖定了保護基遷移的關鍵問題;

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活性關聯(lián):

研究發(fā)現(xiàn) “疏水度(RP-HPLC 保留時間)與大腸桿菌活性正相關"——Luna 柱的穩(wěn)定保留時間重復性,讓這一關聯(lián)分析有了可靠的數(shù)據(jù)支撐,直接助力揭示抗菌肽活性規(guī)律。



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Luna 已經(jīng)成為世界上廣為應用的反相色譜柱,因為它始終將目光交集在色譜分離的

兩個重要指標:分離度和峰形。獨特鍵合技術造就的高柱效和高鍵合相表面覆蓋度使其始終能得到尖銳的色譜峰。

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多肽分子極性差異小、易出現(xiàn)共洗脫,對色譜柱的選擇性和穩(wěn)定性要求高。而 Luna C18 柱恰好踩中了這些需求點:

適用性穩(wěn)定:

實驗中用到 “5% B 到 65% B 梯度洗脫"“65℃流動相溫度",Luna 柱全程穩(wěn)定,無柱效下降問題;

選擇性優(yōu)秀:

無論是 20 殘基的天然抗菌肽,還是帶乙烯基硫醚 / 二硫鍵的修飾類似物,都能實現(xiàn)基線分離;

擴展性一致:

從分析型(4.6mm×250mm)用于粗肽分析,到半制備型用于樣品純化,一套柱子覆蓋 “分析 - 制備" 全流程,減少方法轉移的麻煩。



科研人的 “靠譜工具",從來都不是 “背景板"

在這篇研究里,Luna 柱不只是 “分離工具"—— 它幫團隊確認了 “子-彈類似物對大腸桿菌的選擇性活性",驗證了 “乙烯基硫醚作為二硫鍵替代物的可行性",甚至為 “疏水度預測活性" 提供了量化依據(jù)??梢哉f,每一個關鍵結論的背后,都有精準色譜數(shù)據(jù)的支撐。


如果你也在做肽類合成、抗菌肽篩選,或者需要穩(wěn)定可靠的反相色譜方案,不妨試試 Phenomenex Luna C18 柱 —— 畢竟,好的工具,能讓科研效率翻倍!


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